1. Инструкция По Соблюдению Требований Биологической Безопасности
2. Инструкция По Биологической Безопасности

Books.google.ru - В монографии рассмотрены современные методы анализа генно-модифицированных организмов, дана оценка качества пищевой, фармакологической и сельскохозяйственной продукции. Биологическая безопасность. Современные методические подходы к оценке качества пищевой, фармакологической и сельскохозяйственной продукции.

При работе с патологическим материалом, содержащим микробы, и особенно при культивировании патогенных микробов во избежание заражения персонала лаборатории необходимо соблюдать правила техники биологической безопасности. В зависимости от степени патогенности и контагиозности возбудителей принято выделять четыре уровня. Cовременные принципы биологической безопасности. Лабораторных условиях. Гибкость в совершенствовании инструкций. IFBA’s 2nd International Conference will take place June 28-29, 2012 in Johannesburg, South Africa, immediately following the annual conference of the African Biological Safety Association (AfBSA).

Правила биологической безопасности 1. К работе по взятию и транспортировке биологического материала допускается медицинский персонал, прошедший специальный инструктаж по технике работы и мерам безопасности. При взятии биологического материала должны использоваться средства защиты: медицинские халаты, шапочки, сменная обувь, резиновые (латексные, виниловые) перчатки, а при необходимости — дополнительно марлевые маски (респираторы), очки, клеенчатые фартуки. Работать с исследуемым материалом следует в резиновых (латексных, виниловых) перчатках, все повреждения кожи на руках должны быть закрыты лейкопластырем или напальчником. Следует избегать уколов и порезов.

В случае загрязнения кожных покровов кровью или другими биологическими жидкостями следует немедленно обработать их в течение 2 мин. Тампоном, обильно смоченным 70% спиртом, вымыть под проточной водой с мылом и вытереть индивидуальным тампоном. При загрязнении перчаток кровью их протирают тампоном, смоченным 3% раствором хлорамина, 6% раствором перекиси водорода. При подозрении на попадание крови на слизистые оболочки, их немедленно обрабатывают струей воды, 1% раствором протаргола; рот и горло прополаскивают 70% спиртом или 1% раствором борной кислоты или 0,05% раствором перманганата калия. Для транспортировки образцов следует использовать преимущественно пластиковую одноразовую тару, герметично закрытую пластмассовыми, резиновыми пробками или завинчивающимися крышками. Запрещается использовать стеклянную посуду со сколами, трещинами и т.п.

При транспортировке сосудов, закрытых целлюлозными (ватными) пробками, следует исключить их увлажнение. Транспортировка биоматериала осуществляется в специальных закрытых переносках (укладках), желательно - термостатированных, выдерживающих дезинфекцию. Сопроводительная документация помещается в предназначенный для нее карман переноски (укладки), а в случае его отсутствия — кладется в переноску в отдельном полиэтиленовом пакете. При хранении биологического материала в холодильнике каждый образец упаковывается в отдельный полиэтиленовый пакет. Для этой цели выделяется отдельный холодильник, хранение в котором пищевых продуктов и лекарственных препаратов не допустимо.

Оборудование и среды для взятия материала Для взятия и транспортировки биологического материала следует использовать одноразовые стерильные тубсеры (пробирки с тампонами) промышленного производства или транспортные системы со средой. Ватные (хлопковые) тампоны, изготовляемые непосредственно в лаборатории из медицинской ваты, могут быть использованы только в крайнем случае, так как медицинская вата может обладать антимикробными свойствами. Для снятия возможного бактерицидного действия тампоны из медицинской ваты после изготовления кипятят в буферном растворе Соренсена (18 мл 1/15М раствора КН2Р04 + 8,2 мл 1/15 М раствора NaHP04; pH 7,4), встряхивают, высушивают в термостате, помещают в пробирки и стерилизуют в автоклаве при 120°С 30 минут. Если тампоны предназначены для взятия материала на гонорею, их 20 минут кипятят в фосфатном буфере (181,7 мл 0,2М NaH,P04 + 18,3 мл 0,1 М раствора лимонной кислоты; рН 7,4) и импрегнируют в течение 24 часов в 1% водной суспензией тонко измельченного древесного угля. Затем тампоны высушивают, подправляют, монтируют в пробки и стерилизуют в автоклаве при 120°С 20 минут. Для транспортировки материала целесообразно использовать специальные транспортные системы со средой.

Их выбор с учетом вида материала, цели исследования и технических возможностей осуществляет лаборатория. Числу наиболее универсальных транспортных сред относятся среда Стюарта и среда Эймс. Транспортная система со средой Стюарта.

Среда Стюарта представляет собой полужидкий, бедный питательными веществами субстрат для сохранения и транспортировки широкого спектра патогенных микроорганизмов, таких, как Neisseria gonorrhoeae, Haemophilus influenzae, Corynebacterium diphteriae, Trichomonas vaginalis, Streptococcus sp., Salmonella sp., Shigella sp. Наиболее требовательные микроорганизмы сохраняются в данной среде более суток, прочие - до нескольких дней. Наличие в среде тиогликолата подавляет ферментативную активность бактерий, а отсутствие азота предотвращает их размножение. Транспортная система со средой Кери Блейр. Представляет собой модификацию базовой транспортной среды Стюарта, предназначенную специально для фекальных образцов. Глицерофосфат, являющийся метаболитом некоторых энтеробактерий (Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, и др.), заменен неорганическим фосфатом, удален метиленовый синий, и рН среды поднята до 8,4.

Среда Кери Блейр позволяет сохранять большинство патогенов, включая требовательные микроорганизмы, такие, как Neisseria sp., Haemophilus sp., Streptococcus sp. Данная среда является стандартной для транспортировки анаэробов. Транспортная система со средой Эймса Представляет собой очередную модификацию базовой транспортной среды Стюарта, в которой глицерофосфат заменен неорганическим фосфатом.

Эта среда способна более 3 дней поддерживать такие микроорганизмы, как Neisseria sp., Haemophilus sp., Corynebacteria, Streptococci, Enterobacteriaceae и др., однако наилучшие результаты дает культивирование в течение первых 24 часов. При использовании транспортной системы со средой срок доставки пробы в лабораторию может быть продлен максимально до 72 часов. Техника взятия основных видов биологического материала Кровь Показания к проведению исследования: клиническая картина сепсиса; лихорадочные состояния неустановленной этиологии; пневмонии; подозрение на инфекционные заболевания: брюшной тиф и паратифы, сальмонеллезы, бруцеллез, возвратный тиф, лептоспирозы, малярия, эпидемический менингит, пневмококковые инфекции, пищевые токсикоинфекции (при наличии лихорадки), стафилококковые и стрептококковые инфекции, сибирская язва, туляремия, чума. Количество независимо отбираемых проб крови и время их взятия определяется лечащим врачом (табл.

В процессе подготовки студенты получают навыки работы в AutoCad MEP. Wilo-Select, A-Clima, Halton HIT, DX PRO Select, Split Select и программу. Компьютерная программа CLIMA CAD, помогающая подобрать необходимую комплектацию установки, учитывая габаритные размеры, подробные. VTS CLIMA — новый стандарт в вентиляции и кондиционировании воздуха. Каталога, программа CLIMA CAD on-line доступны на сайте VTS CLIMA. VTS Clima приточно-вытяжные установки, центральные кондиционеры. Каталог оборудования и компьютерная программа его подбора CLIMA CAD. Dec 29, 2017 - Таким образом, разработанная VTS программа подбора. Подробные параметры доступны в программе подбора CLIMA-CAD on-line.

Как правило, должны исследоваться не менее 2—3 проб крови, каждая из которых взята путем отдельной венепункции. Это необходимо для дифференциации истинной бактериемии от случайной контаминации крови при венепункции. Вероятность загрязнения вследствие случайного прокола сальной или потовой железы составляет 3%. Рекомендуемое число отбираемых проб крови в зависимости от клинической ситуации Острый сепсис, менингит, менингококцемия, остеомиелит, артрит, острая пневмония, пиелонефрит - из двух сосудов или двух участков кровеносного сосуда перед началом антибактериальной терапии; Лихорадка неясного генеза - сначала 2 пробы из разных кровеносных сосудов (двух участков сосуда), затем через 24—36 ч. Еще 2 пробы Эндокардит, вялотекущий сепсис: в период обострения при подостром или вялотекущем течении - из двух сосудов или двух участков кровеносного сосуда первые 1— 2 часа подъема температуры тела, до начала терапии сначала 3 пробы с интервалом 15 мин.

Если они отрицательны, на вторые сутки собирают еще 3 Эндокардиты у пациентов: получающих антибактериальную терапию на фоне антибиотикотерапии - по 2 отдельные пробы в течение трех дней в течение 48 ч Примечание: У больных, получающих антибактериальные препараты, пробы необходимо собирать непосредственно перед введением следующей дозы препарата. При наличии лихорадки оптимальным является взятие крови на фоне повышения температуры тела (но не на пике температуры!).

Необходимое оснащение. Шприцы одноразовые 20-граммовые (для детей 10-граммовые) с иглами для венепункции. Запрещается использовать шприцы со «стерильного стола» в перевязочной, проверять проходимость иглы, просасывая через нее воздух.

Инструкция По Соблюдению Требований Биологической Безопасности

Флаконы с питательными средами: среда для аэробов и факультативных анаэробов + среда для облигатных анаэробов (например, двойная среда + среда СКС) или универсальная среда для аэробов и анаэробов. Предпочтительно использовать промышленно произведенные среды, разрешенные к применению. Оптимальным средством отбора пробы венозной крови являются вакуумные двухфазные флаконы к аппарату Бактек (Bactec). 70° этиловый спирт, 2% или 5% настойка йода. Венозный жгут. Резиновые (латексные, виниловые) перчатки.

Спиртовка (только при использовании флаконов со средами, изготовленными в лаборатории). Взятие исследуемого материала. Манипуляции проводят с соблюдением правил асептики. Кровь берут у постели больного или в перевязочной (процедурной) и тут же засевают на питательные среды. Рекомендуется осуществлять эти процедуры вдвоем. Один медицинский работник проводит обработку кожи больного, венепункцию и взятие крови, второй, в это время открывает над пламенем спиртовки пробки флаконов со средами, подставляет их под струю крови из шприца, обжигает горлышки флаконов и закрывает их. Кровь для исследования получают путем венепункции.

Порядок обработки кожи и взятия крови следующий: 1. Кожу над пунктируемой веной обрабатывают 70° спиртом; 2. Наносят 2-5% йодную настойку, круговыми движениями, начиная от центра, в течение 30 сек.; 3. После высыхания йодной настойки проводят венепункцию; 4. Пальпировать сосуд в районе введения иглы после обработки кожи нельзя; 5. Протирают кожу 70° спиртом. У взрослых кровь берут в объеме 10-20 мл, у детей — в зависимости от возраста.

Сразу после взятия кровь засевают на питательные среды. Соотношение крови и среды должно быть 1/10—1/60 для устранения бактерицидного действия крови путем ее разведения. Техника посева зависит от вида используемых питательных сред. При использовании сред лабораторного приготовления, расфасованных во флаконы с целлюлозными (ватными) пробками, посев проводят следующим образом: снимают иглу со шприца; над пламенем спиртовки открывают флакон; вносят половину крови из шприца во флакон; обжигают горлышко и пробку флакона в пламени спиртовки; закрывают флакон пробкой; осторожно, чтобы не замочить пробку, перемешивают содержимое флакона круговыми движениями; вторую порцию крови из шприца вносят во второй флакон, повторяя указанные операции. При использовании флаконов со средами промышленного изготовления во флаконах с резиновыми либо пластиковыми пробками: при наличии на флаконах защитных колпачков их удаляют (отгибают), не открывая при этом пробки; пробки флаконов обрабатывают 70% этиловым спиртом (использование йодной настойки определяется рекомендациями производителя сред); кровь в равных объемах вносят в «аэробную» и «анаэробную» питательные среды, проколов при этом пробки флаконов. Если предполагается проведение бактериоскопического исследования, дополнительно готовят препарат «толстая капля» и мазок.

Инструкция По Биологической Безопасности

Для приготовления мазка каплю крови диаметром 2—3 мм наносят на обезжиренное предметное стекло вблизи от торца. Перед каплей крови ставят под углом 45° одноразовый пластиковый шпатель для растяжки мазков или стекло со шлифованным краем и плавным движением равномерно распределяют материал по поверхности.

Для приготовления препарата «толстая капля» на стекло наносят каплю крови диаметром около 5 мм и распределяют ее с помощью иглы или пипетки в диск диаметром 10—15 мм. Толщина капли должна позволять видеть через нее газетный шрифт. Иногда мазок и препарат «толстая» капля готовят на одном стекле. Для этого на поверхность приготовленного как описано выше мазка до его высыхания наносят еще одну каплю крови. Она, как правило, сама растекается в правильный диск необходимой толщины.

Препараты высушивают («толстая капля» сохнет 2—3 часа) и доставляют в лабораторию в специальном планшете для хранения и транспортировки стекол с соблюдением необходимой осторожности. Посевы крови немедленно доставляют в лабораторию, оберегая от охлаждения. Бактериологическая лаборатория при исследовании посевов крови выдает отрицательный ответ в случае, если рост микроорганизмов не обнаружен в течение 10 дней инкубации. В случае наличия у больного подозрения на внутрисосудистую инфекцию или бруцеллез возникает необходимость пролонгированной (до 1 месяца) инкубации посевов. Это должно быть особо отмечено в направлении. Рутинный посев крови не обеспечивает выявления ряда микроорганизмов. Ликвор Показания к проведению исследования: подозрение на нейроинфекцию.

При подозрении на гнойный менингит в обязательном порядке в лабораторию направляют: 1. Ликвор для первичного посева, бактериоскопии и серологических исследований в количестве не менее 1,0 мл. Ликвор в 0,1% полужидком агаре (среда «обогащения»).

«Толстая капля» крови для бактериоскопии. Кровь в жидкой питательной среде или в 0,1% полужидком агаре (среда обогащения) для бактериологического накопления культуры: 5,0 мл крови засевают в 50,0 мл среды обогащения. Кровь в количестве не менее 2-х мл для серологических исследований (РПГА, ВИЭФ, ЛА и др.). Необходимое оснащение: Игла для люмбальной пункции. 70° этиловый спирт. 2% или 5% настойка йода или другой антисептик, разрешенный к применению.

Перевязочный материал. Стерильные пластиковые пробирки, лучше центрифужные с завинчивающимися крышками. Шоколадный агар (желательно). 0,1% полужидкий агар. Взятие исследуемого материала: Ликвор получают путем люмбальной пункции. Желательно взять материал сразу при поступлении больного в стационар, до начала лечения.

Пункция и взятие материала проводятся с соблюдением всех правил асептики, персонал работает в масках. Больной укладывается в положение на боку, головной конец кровати максимально опущен, голова прижата к груди, ноги — к животу, спина максимально согнута. Определяются необходимые для выбора места пункции анатомические ориентиры. Пункцию проводят между поясничными позвонками L3-L4, L4-L5 или пояснично-крестцовыми L5-S1. Обрабатывают область пункции сначала раствором антисептика, а затем 70° спиртом. Пальпируют рукой в стерильных перчатках точку пункции и вводят раствор анестетика. Проводят пункцию иглой со вставленным мандреном до ощущения «провала».

Извлекают мандрен. Первую порцию ликвора берут в отдельную пробирку для проведения общего ликворологического исследования. Вторую порцию, предназначенную для бактериологического исследования, собирают в стерильную центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой. Ликвор после пункции распределяют следующим образом: 1) 1,0 мл направляют в клиническую лабораторию для проведения общего ликворологического и цитологического исследования; 2) 0,2 мл направляют для постановки полимеразной цепной реакции (ПЦР); 3) 1,0 мл направляют для первичного бактериологического посева (если не сделан в отделении при пункции), бактериоскопии и серологических исследований; для бактериологического и бактериоскопического исследований отбирается либо вторая порция ликвора, либо самая мутная из всех. Ее отбирают в стерильную, желательно центрифужную пробирку с завинчивающейся крышкой; 4) 0,5 мл засевают в чашку с «шоколадным» агаром непосредственно у постели больного. Далее чашку хранят в условиях термостата при 37°С до доставки в лабораторию; 5) 0,5 мл засевают в 5,0 мл 0,1% полужидкого питательного агара непосредственно у постели больного и далее хранят при +37°С в условиях термостата до доставки в лабораторию; Касаться руками краев канюли, иглы, пробирки, класть пробку — нельзя.

Доставлять материал в бактериологическую лабораторию лучше в термостатированной переноске (сумке) на грелке с водой + 37—38°С; в отсутствие возможности немедленно доставить материал в лабораторию, его лучше поместить в транспортную систему со средой Эймс (с углем или без него) и тогда его можно хранить в термостате до 48 часов. Доставка материала в транспортной системе должна производиться также с обеспечением мер поддержания температуры +37°С. При необходимости проведения вирусологических исследований пробы ликвора в стерильной пластиковой пробирке помещают в холодильник при температуре +2.+8°С или замораживают. Желчь Показания к проведению исследования: воспалительные заболевания желчного пузыря и желчных протоков (холециститы, холангиты, желчнокаменная болезнь). При острых холангитах параллельно исследуют кровь. Диагностика брюшного тифа и брюшнотифозного бактерионосительства.

Необходимое оснащение: Комплект для дуоденального зондирования. Стерильные пробирки или стерильные контейнеры. Транспортная система для облигатных анаэробов (со средой Кери Блейр), разрешенная для применения в установленном порядке или пробирки с тиогликолевой средой, консервантом для облигатных анаэробов или стерильный шприц со стерильной резиновой пробкой (при взятии материала во время операции).